乌头草

发布时间:2015-06-11 来源: 乌头草狼人

第一篇:乌头草

新疆乌头草的急性毒性观察和心脏毒性的测定 李光来 管小江 1 1 ﹡ 侯新华 苏振磊 1 1 田春霞 1 于拔萃 2,郑秋生 2 (1).新疆哈密红星医院急诊科,新疆 哈密 839000) (2).新疆特种植物药资源教育部重点实验室 石河子大学药学院,新疆 石河子 832002) ﹡ 基金项目:新疆生产建设兵团科委 2009 年科技计划(2009GG52) 摘要:目的 研究了新鲜乌头草对小鼠的急性毒性。方法 采取新鲜乌头草,粉碎 榨汁;小鼠灌胃给新鲜乌头草汁,观察小鼠所出现的毒性反应、组织学变化,并 测定离体心脏的心肌功能的变化。结果 小鼠出现毒性反应的时间约在半小时左 右, 组织学改变不明显; 心脏给药后表现为心率失常, 心肌功能各指标下降。

结 论 新鲜乌头草有很大的急性毒性,主要毒性靶器官是心脏组织。

关键词:乌头草;急性毒性;心律失常;心肌功能 乌头草是毛莨科乌头属多年生草本植物, 因植株体内含有乌头碱而具一定毒 性。新疆乌头草分布较广,田边、林带、山坡均生长茂盛,哈密分布以天山北坡 为主。由于近年来草场过度放牧,草场退化导致生态失衡,乌头草每年以 5-10% 的速度递增而泛滥成灾,随着人民生活水平的提高,回归大自然,食用野菜已成 为一种新的消费观念, 由于乌头草外型色泽与野芹菜极为相似,采集野芹菜中夹 杂乌头草事件日益频繁和增多,因误食“乌头草”引起中毒的病例在逐年增加[1]。

对于乌头碱中毒的临床表现和作用机制的研究屡见不鲜, 然而关于新鲜乌头草中 毒的实验研究很少。

本文就新鲜乌头草的急性毒性进行了报道,可为临床治疗乌 头草中毒病人的治疗提供依据,为制定《防治乌头草中毒的指南》提供实验数据 和基础。 1. 材料与方法 1.1 受试药物 天山乌头草新鲜茎叶 500 g,由新疆哈密市红星医院医务科主任管小江老师 鉴定提供,加入适量液氮,冷冻粉碎,再加入 500 ml 蒸馏水榨汁,过滤收集到 600 ml 乌头草汁液。-80℃冷藏备用。

作文1.2 实验动物 昆明种小鼠 120 只,雌雄各半,体重 18~22 g,由新疆地方疾病控制中心实 验动物室提供,合格证号

SCXK(新)2010-00103。在动物房适应 5d 后开始试 验。 2. 实验方法 2.1 预实验 取体重 18~22 g 小鼠 20 只(雌雄各半), 禁食不禁水 12 h, 5 组, 分 每组 4 只。 通信作者:管小江,新疆哈密红星医院急诊科,邮编:839000,电话:09022259436 , E-mail:gxj195966@126.com 用 5 倍稀释的不同剂量乌头草汁灌胃,造成不同程度动物死亡,参照文献方法进 行 LD50 的测定[2]。分别用 0/4 与 4/4 致死剂量组,递增或递减一定比例的剂量, 再次实验,找出 0%和 100%死亡剂量的所在范围。

2.2 急性毒性实验 取体重 18~22 g 小鼠 50 只(雌雄各半),灌胃前禁食不禁水 12 h ,分 5 组, 每组 10 只。根据预试时的致死情况,计算出乌头草汁中毒的相应剂量,并由此 配制出一系列不同浓度的药液。将不同浓度的药液分别给各组动物灌胃给药 1 次,体积均为 20 ml/kg。给药后每日观察,连续 2 周,正常饮食。记录动物毒性 反应及死亡数。观察的指标包括一般指标:动物外观、行为、分泌物、排泄物; 动物死亡情况:死亡时间、濒死前反应。记录所有的死亡情况、出现的症状,以 及症状起始的时间、严重程度、持续时间、是否可逆。对于所有的试验动物进行 解剖,器官出现体积、颜色、纹理改变时,记录并进行组织病理学检查。

2.3 组织病理学检查 用脊椎脱臼法处死小鼠,解剖并肉眼观察心脏、脑、肾脏、肝脏各主要器官 的变化,用 10%的福尔马林溶液固定、脱水、石蜡包埋、切片,经 HE 染色,光 镜检查。

2.4 离体心脏灌注模型 实验方法根据 (Ji, Y. et al.) [3],取大鼠称重,腹腔注射60 mmol· -1的水合氯醛 L (0.35 g· -1,ip) 麻醉。迅速开胸取出心脏,置于95% O2和5% CO2混合气体充分 kg 饱和4℃的K-H (NaCl 118.3 mmol/L、 KCl 4.74 mmol/L、 CaCl2 1.2 mmol/L、 2PO4 KH 1.18 mmol/L、MgCl2 1.2 mmol/L、NaHCO3 24.9 mmol/L、Glucose 11 mmol/L, HCl调节pH值为7.4) 液中, 然后将心脏固定于Langendoff装置上, 用95% O2和5% CO2混合气体充分饱和的K-H缓冲液恒压逆行灌流。剪开左心耳,球囊从左心耳 插入左心室,球囊内压调至5-10 mmHg。球囊导管连接压力换能器,与生物多导 仪相连,连续记录心功能左心室舒张压 (LVEDP)、左心室收缩 (LVSP)、左心室 发展压 (LVDP, LVDP = LVSP - LVEDP),生物记录软件自动分析左心室压力升 高速率 (+ dp/dtmax)、左心室压力降低速率 (- dp/dtmin) 以及心率(HR),以计滴器 实时记录冠脉流量 (CF)。

新鲜乌头草灌注离体心脏分组给药处理如下:(1)对照组:以K-H液平衡 灌流100 min;(2)高剂量组:以K-H液平衡灌流30 min,改用含75μg/ml 天山 乌头草的K-H液灌流10 min,以K-H液再灌流60 min;(3)中剂量组:以K-H液 平衡灌流30 min, 改用含70μg/ml 天山乌头草的K-H液灌流10 min, 以K-H液再灌 流60 min;(4)低剂量组:以K-H液平衡灌流30 min,改用含60μg/ml 天山乌头 草的K-H液灌流10 min,以K-H液再灌流60 min。以生理记录仪记录灌流全过程 心功能变化情况,以软件自动分析再灌注5min、10 min、20 min、30min、40min、 50min和60 min时间点各指标情况以反映心功能状况。

以给药前30min数值为基础 值100%,实验结果以缺血前心功能百分率表示。

2.5 数据处理 所有实验数据以 x ? s 。采用SPSS 10.0软件处理,origin6.0进行图片处理, p<0.05具有数理学统计意义。 3. 结果 3.1 组织病理学检查结果 组织切片检查各器官均无明显差异,对比图片见附录一。

3.2 离体心脏灌注数据 3.2.1 新鲜乌头草对心率的影响 与对照组相比,给药组给药开始的很短的时间内,心脏有明显地心率失常; 随着时间的增加,心脏心率有升高的现象。

表.1 乌头草给药后各组之间心率变化情况 组别 2min 对照 60ul 75ul 97.02 97.03 102.19 5min 90.68 78.26 96.56 8min 98.71 318.33 353.68 10min 97.54 66.38 394.92 给药后心率(%) 20min 98.02 360.03 396.78 30min 98.39 345.79 398.10 40min 99.79 300.02 393.34 50min 99.07 236.33 349.72 60min 100.07 134.19 299.76 70min 100.53 121.86 229.18 3.2.2 新鲜乌头草对左心室发展压的影响 与对照组相比,给药组在给药后短时间内下降,停药之后略有恢复。说明乌 头草使得心肌收缩功能明显下降。

表.2 乌头草给药后各组之间 LVDP 变化情况 组别 2min 对照 60ul 75ul 100.64 94.97 86.80 5min 100.24 100.44 94.82 8min 96.17 19.04 15.19 10min 99.56 7.46 11.41 给药后LVDP(%) 20min 100.02 13.29 10.11 30min 97.28 14.64 10.60 40min 98.13 18.13 19.79 50min 95.76 26.67 60.79 60min 100.01 45.60 65.42 70min 96.56 45.65 70.32 3.2.3 新鲜乌头草对冠脉流量的影响 与对照组相比,给药组在给药后冠脉流量程下降趋势,停药后没有恢复,仍 有降低的趋势。

表.3 乌头草给药后各组之间 CF 变化情况 组别 2min 对照 99.53 5min 96.70 8min 99.05 10min 100.04 给药后CF(%) 20min 99.77 30min 98.58 40min 94.34 50min 95.28 60min 100.30 70min 97.17 60ul 75ul 94.06 98.32 86.14 93.28 91.09 91.60 92.57 92.44 80.69 79.83 73.76 78.15 64.36 71.43 56.93 52.10 51.98 49.58 48.02 47.06 4. 结论 综上所述,在乌头草对小鼠急性毒性中,灌胃给药的LD50是7.749 g/kg;可 能由于乌头草急性毒性发作时间较短,没有明显的组织学变化;通过离体心脏灌 流实验表明给药后心脏心率失常,左心室发展压下降,冠脉流量下降,再次证明 了乌头草导致小鼠死亡的主要原因是其心脏毒性。 参考文献

[1] 管小江, 李光来, 张忠民, 王旭良, 田春霞, 谢建新, 王国伟. 新疆天山乌头草急性中毒 41例临床救治探讨[J]. 中国民间疗法, 2009, l 7(5)

52-53. [2] 黄世佐, 明海霞, 刘家骏, 李彤. 单叶细辛的急性毒性观察及半数致死量的测定[J].中国 中医药信息杂志, 2005,12(9)

23-25. [3] Ji, Y., Pang, Q, F., Guang Xu., et al. Exogenous hydrogen sulfide postconditioning protects isolated rat hearts against ischemia-reperfusion injury [J]. European Journal of Pharmacology. 2008, 587, 1–7.

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21 0 2年 第3 0卷 第 3期  新疆 中医药  Xni gJun l f rd i a C ieeMei n  i a  o ra o  aio l hns  dc e jn   T tn   i 表1   2 1 V k0 N . 0 2 o3  o  3 6  7 取 上述 对 照 品贮 备液 (. ? L.24 68 1t , 01 m - 、、 、、0x   mg ) +申请认证

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21 0 2年 6月 第 2期 (   总第 15期 ) 5   草食 家畜 ( 刊 ) 季   有毒植物 乌头草 中毒及治疗  阿克别 克 ? 吉别 克  古丽娜 尔 塔 ,   (. 1 新疆 维吾 尔 自治 区草原 总站 , 新疆 2 新疆 阿 勒泰 畜牧兽 医职业学 校 , 疆 . 新 乌鲁木 齐 阿勒 泰 8 04 ; 3 0 9  860 ) 350  摘 要

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